Грамотрицательные бактерии, их строение и заболевания. Грамотрицательные кокки семейства Neisseria менингококки гонококки Возбудители негонококковых Грамотрицательные и грамположительные кокки отличие между ними

Грамотрица́тельные бакте́рии - это бактерии, которые не окрашиваются кристаллическим фиолетовым при окрашивании по Граму. В отличие от грамположительных бактерий, которые сохранят фиолетовую окраску даже после промывания обесцвечивающим растворителем (спирт), грамотрицательные полностью обесцвечиваются. После промывания растворителем при окрашивании по Граму добавляется контрастный краситель (обычно сафранин), который окрашивает все грамотрицательные бактерии в красный или розовый цвет. Это происходит из-за наличия внешней мембраны, препятствующей проникновению красителя внутрь клетки. Сам по себе тест полезен при классификации бактерий и разделении их на две группы относительно строения их клеточной стенки. Из-за своей более мощной и непроницаемой клеточной стенки грамотрицательные бактерии более устойчивы к антителам, чем грамположительные. Обычно патогенность грамотрицательных бактерий связывают с определёнными компонентами их клеточных стенок, а именно, с липополисахаридным слоем (ЛПС или эндотоксический слой). В человеческом организме ЛПС вызывает иммунный ответ, который характеризуется синтезом цитокинов и активацией иммунной системы. Обычной реакцией на синтез цитокинов является воспаление, что также может привести к увеличению количества токсичных веществ в организме хозяина.

Грамположительные бактерии (обозначаются Грам (+)) - бактерии, которые, в отличие от грамотрицательныхбактерий, сохраняют окраску, не обесцвечиваются при промывке при использовании окраски микроорганизмов пометоду Грама.

Большинство Грам (+) бактерий имеют однослойную клеточную мембрану, без внешней мембраны, присущейграмотрицательным бактериям. Исключением является тип Deinococcus-Thermus.

Большая часть патогенных для человека микроорганизмов относится к грамположительным. Шесть родов грамположительных организмов являются типичными патогенами человека. Два из них, стрептококки и стафилококки, являются кокками (шарообразными бактериями). Остальные - палочковидные и делятся далее по возможности образовывать споры.

Неспорообразующие: Corynebacterium и Листерия; спорообразующие: Бациллы и Клостридии. Спорообразующие можно разделить на факультативных анаэробов Бациллы и облигатных анаэробов Клостридий.

Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний проводится в трех основных направлениях:

1) поиски возбудителя заболевания в материале, взятом у больного (испражнения, моча, мокрота, кровь, гнойное отделяемое и др.);

2) обнаружение специфических антител в сыворотке крови - серологическая диагностика;

3) выявление повышенной чувствительности организма человека к возбудителям инфекционных заболеваний - аллергический метод.

Для выявления возбудителя инфекционного заболевания и его идентификации (определения вида возбудителя) используют три метода: микроскопический, микробиологический (бактериологический) и биологический.

Лечение

Адекватный подход к лечению инфекционных болезней построен на комплексном воздействии, которому подвергаются все составляющие инфекции. Большую роль играют терапевтические методы, объектом которых являются бактерии и вирусы, а также токсины, выделяемые ими. Кроме того, нужно позаботиться о нормализации обмена веществ, укреплении иммунной системы и восстановлении биологического равновесия с той средой, в которой живет пациент.

Антибиотики назначаются лечащим врачом, когда возбудитель инфекции слишком силен и есть опасность того, что возникнут серьезные осложнения и организм не справится самостоятельно. При этом следует понимать, что лечение не подразумевает исключительно прием антибиотиков. Комплексный подход к лечению инфекционных заболеваний дает наилучший результат. В частности, хороший эффект обеспечивает патогенетическая терапия, цель которой - ликвидация болезнетворных цепных реакций организме пациента. В связи с этим большое значение имеет нормализация тех функций систем и органов организма, которые оказались нарушены из-за инфекции. Это означает пересмотр рациона в сторону правильного питания, лечение сердечными препаратами, лечение препаратами, влияющими на нервную систему, прием достаточного количества витаминов и средств противовоспалительного характера.

Стафилококковая инфекция - это группа заболеваний, вызванных золотистыми стафилококками, которые могут проявляться как легкими формами (воспаление кожи), так и тяжелыми процессами (пневмония (воспаление легких), сепсис (воспалительный процесс во всех органах человека или « заражение крови»)).
Отличительной особенностью стафилококков является их способность вырабатывать токсины (вредные вещества, появляющиеся в результате жизнедеятельности вируса). Эти токсины оказывают сильнейшее воздействие на организм человека.

Менингококковая инфекция – это острое инфекционное заболевание, причиной которого является бактерия – Neisseria meningitidis . Тяжесть менингококковой инфекции колеблется от назофарингита до молниеносного сепсиса, приводящего к смерти за несколько часов. Немногие инфекции имеют столь катастрофичное течение.

Материал для исследований может забираться как от больных, так и от медперсонала, кроме того исследованию подлежат объекты окружающей среды: воздух, почва, смывы с окружающих предметов, лекарственные формы и т.д.

От людей забирается на исследование: отделяемое дыхательных путей, мокрота, слизь зева, носа, носоглотки; моча, испражнения, желчь, спиномозговая жидкость, кровь, гной (маститы, фурункулы, карбункулы, абсцессы, флегмоны и т.п.), отделяемое язв, свищей; отделяемое женских половых органов и др.

Следует помнить о соблюдении правил техники безопасности при заборе материала для исследований, поскольку он представляет опасность для здоровья медицинского персонала. Обязательно применение спецодежды и средств индивидуальной защиты, включая защитные очки, смотровые или хирургические перчатки и медицинские респираторы (при риске попадания контаминированных частиц и аэрозолей в дыхательные пути)

ТЕМА №8. Кишечная группа бактерий. Эшерихии. Шигеллы. Выделение чистой культуры энтеробактерий (1,2,3,4 день). Посев на холеру. Сальмонеллы. Особенности микробиологической диагностики в связи с патогенезом заболеваний. Принципы лечения, профилактика.

Общая характеристика. Семейство кишечных бактерий (Enterobacteriaceae) объединяет обширную группу грамотрицательных неспорообразующих палочек. Они широко распространены в природе, обитают в кишечнике человека и животных. Среди них встречаются сапрофиты, условно-патогенные бактерии и патогенные виды.

Согласно Международной классификации (1963), все семейство кишечных бактерий разделено на 13 родов, из которых наибольшее значение для человека имеют:

1) род Escherichia, включающий группу кишечной палочки;

2) род Salmonella, куда входят возбудители брюшного тифа, паратифов и пищевых токсйкоинфекций;

3) род Shigella- возбудители бактериальной дизентерии;

4) род Proteus, включающий группу протея;

5) род Klebsiella - группа капсульных бактерий, возбудителей инфекций дыхательных и мочевых путей.

Кишечная палочка имеют типичную для энтеробактерий форму и представлены короткими подвижными палочками с закруглёнными концами.

• На плотных средах бактерии образуют плоские выпуклые мутные S-колонии с ровными или слегка волнистыми краями (3-5 мм в диаметре) либо сухие плоские R-колонии с неровными краями.
• В жидких средах растут диффузно, вызывая помутнение среды и образование осадка (реже формируют поверхностную плёнку или пристеночное кольцо).
• На средах Хисса кишечная палочка может образовывать газ. На селективно-дифференциальных средах колонии принимают цвет, соответствующий окраске среды. На агаре Эндо лактоза-положительные эшерихии образуют фукс и ново-красные колонии с металлическим блеском, лактоза-отрицательные - бледно-розовые или бесцветные с тёмным центром. На среде Левина бактерии формируют тёмно-синие колонии с металлическим блеском, а лактоза-отрицательные - бесцветные, на среде Плоскирева - соответственно красные с жёлтым оттенком или бесцветные. На КА могут давать полный гемолиз.

Шигеллы относятся к роду Shigella. Являются возбудителями дизентерии. Род включает в себя четыре вида:

1) Sh. disenteriae; (внутри вида делятся на 12 сероваров; один из них – шигелла Григорьева-Шига);

2) Sh. flexneri; (делится на 6 сероваров);

3) Sh. boydii; (делится на 18 сероваров);

4) Sh. sonnei; (в антигенном отношении вид однороден, внутри вида выделяют ферментовары, фаговары, колециновары).

Шигеллы имеют вид палочек без жгутиков, с закругленными концами размером 2–3 на 0,5–0,7 мкм. Не образуют спор и капсул. Шигеллы плохоустойчивы к воздействию физических, химических и биологических факторов окружающей среды. В воде, почве, пищевых продуктах, на предметах, посуде, овощах, фруктах шигеллы живут в течение 5–14 дней. При температуре 60 °С шигеллы гибнут через 10–20 минут, при 100 °С - мгновенно. Прямой солнечный свет убивают шигелл в течение 30 минут. При отсутствии солнечного света, повышенной влажности и умеренной температуре шигеллы сохраняют жизнеспособность в почве до 3 месяцев. В желудочном соке шигеллы могут выживать лишь несколько минут. В пробах кала шигеллы погибают от действия кислой реакции среды и бактерий-антагонистов через 6–10 часов. В высушенном или замороженном кале шигеллы жизнеспособны в течение нескольких месяцев.

Шигеллы попадают в толстый кишечник. Прикрепляются к рецепторам мембран колоноцитов и проникают внутрь с помощью белка наружной мембраны. Гибель клеток приводит к образованию эрозий и язв, окруженных перифокальным воспалением.

Род сальмонеллы (лат. Salmonella) входит в семейство энтеробактерии(лат. Enterobacteriaceae), порядок энтеробактерии (лат. Enterobacteriales), класс гамма-протеобактерии (лат. γ proteobacteria), тип протеобактерии (лат. Proteobacteria), царство бактерии.

Подвид Salmonella enterica enterica включает следующие серогруппы:

A (наиболее известен серотип paratyphi A)

B (серотипы: typhimurium, agona, derby, heidelberg, paratyphi B и др.)

С (серотипы: bareilly, choleraesuis, infantis, virchow и др.)

D (серотипы: dublin, enteritidis, typhi и др.)

E (наиболее известен серотип anatum)

Сальмонеллы - палочкообразные с закругленными краями, грамотрицательные, не образующие споры и капсулы, в основном подвижные бактерии, имеющие диаметр от 0,7 до 1,5 мкм и длину от 2 до 5 мкм и распределенные по всей поверхности жгутиками.

Посев холеры проводят на жидкие среды обогащения, щелочной МПА, элективные и дифференциально-диагностические среды (например, TCBS-arap). Изучают рост на первой среде накопления и выполняют высев на щелочной агар и вторую среду накопления (что повышает высевае-мость возбудителя). Если на первом этапе при исследовании нативного материала ускоренными методами получают положительные результаты, пересев на вторую среду накопления не проводят. Подозрительные колонии пересевают для выделения чистых культур. Затем определяют морфологические, биохимические свойства и антигенную структуру холеры с помощью агглютинирующих О-, OR-, Инаба- и Огава-антисывороток. Важное диагностическое значение имеет типирование с помощью холерных диагностических бактериофагов. Все V. cholerae лизируются бактериофагом IV группы, а вибрионы биовара Эль-Тор - фагами группы V.

Царство микроорганизмов необыкновенно интересно и сложно устроено. Например, существуют микробы, которые выживают и размножаются, если перед этим их несколько суток подряд кипятить.

Другие погибают, если на питательную среду добавляется обычный сахар. Как разобраться в этом паноптикуме миниатюрных живых существ, несущих не только жизнь, но и смерть?

Очень просто: покрасить!

Ганс Христиан Грам достоин памятника

Дания дала миру удивительного человека, почти полную тёзку великого сказочника Андерсена. Но Грам не сочинял сказок. Мировую известность ему принес его знаменитый метод окраски микроорганизмов, по которому все царство бактерий можно разделить на две большие группы: грамположительные и грамотрицательные бактерии .

Особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий «в двух словах» объясняется так:

• грамположительные бактерии образуют споры, экзотоксины, имеют оболочку, легко проницаемую для антибиотиков и окрашиваются в синий цвет анилиновым красителем;
• грамотрицательная флора не образует спор, «вооружение» и толщина клеточной стенки у них толще, они образуют эндотоксины, и «достать» эту флору лекарствами гораздо труднее. Окрашиваются в красный цвет фуксином, после удаления анилинового красителя.

Те, кто окрашивается положительно, способны удерживать анилиновый краситель, и его «нельзя отмыть». Это спорообразующие кокки, клостридии, бациллы, коринебактерии они прокрашиваются в красно – фиолетовый цвет. Клеточная стенка грамотрицательных бактерий неспособна удержать комплекс анилинового красителя, он легко вымывается, и эти микробы хорошо воспринимают последующее окрашивание в синий цвет.

О строении клеток грамотрицательной флоры

Строение грамотрицательных бактерий более «солидное» и «пуленепробиваемое», чем у кокков. Это объясняется тем, что клеточная стенка у грамотрицательной флоры более мощная, и толстая. Она успешно противостоит влиянию антител и лекарств, поэтому многие виды грамотрицательных бактерий стали настоящей проблемой для клинических фармакологов и разработчиков антибиотиков.

У этих микроорганизмов есть внешняя капсула, или липополисахаридная мембрана, которая оказывает на организм человека вредное действие. Этот слой является источником эндотоксинов, то есть веществ, которые выходят наружу при разрушении микробной клетки. Эндотоксины являются сильными индукторами воспаления, провоцируя иммунный ответ.

Где встречается грамотрицательная флора, и какой она бывает

Мир полон микробов. Это утверждение на 100% соответствует распространению этой флоры. Существует множество семейств грамотрицательных кокков (шаровидных микробов) и палочек.

К ним относят, в том числе:

• псевдомонады. Они применяются в химической и микробиологической промышленности, как продуценты многих органических кислот и соединений;
• Моракселлы;
• ацинетобактерии;
• флавобактерии.

Непосредственно заболевания у человека вызывают сальмонеллы (сальмонеллез, брюшной тиф), шигеллы (дизентерию), легионеллы. Наиболее яркими представителями патогенной флоры являются нейссерии, вызывающие гонорею и менингит. Они относятся к диплококкам. Грамотрицательными являются гемофильные палочки, геликобактер пилори, энтеробактер и протей.

Эти микроорганизмы обладают общей способностью сохранять углеводную лабораторную среду, вследствие слабой ферментативной активности. Эти неферментирующие сахар грамотрицательные бактерии находятся повсюду . Они встречаются в почве, в воде, попадают на пищевые продукты. Испражнения человека и животных также сдержит большое количество этих микроорганизмов. Они находятся на коже, в верхних дыхательных путях.

Существуют полезные грамотрицательные микробы: так, азотфиксирующие клубеньковые бактерии на корнях бобовых растений, которые обогащают почву азотом, также относятся к данному виду микробной флоры. К грамотрицательной флоре относятся и метановые бактерии, которые в качестве единственно возможного источника пищи рассматривает СН4, или метан. Некоторые кокки и палочки относятся к факультативным анаэробам, то есть для их роста и размножения вовсе не обязательно присутствие кислорода воздуха.

Роль в развитии заболеваний

Грамотрицательными бактериями являются многие условно – патогенные виды. Это означает, что если у человека сильный иммунитет, то ему не страшна такая инфекция . Конечно, чума или холера может «свалить» любого здоровяка с непредсказуемыми последствиями, а вот внутрибольничная инфекция, к которой и относят грамотрицательные палочки, способствует развитию внутрибольничных пневмоний, раневых госпитальных инфекций у ослабленных людей. Отчего это происходит?

Просто в силу своей «толстокожести» эти микробы иногда выживают, несмотря на дезинфекцию. Они находятся на масках наркозной аппаратуры, на ларингоскопах и бронхоскопах, на нестерильных повязках. Это вовсе не значит, что они такие зловредные, просто все другие микробы были уничтожены асептикой и антисептикой, а часть стойких грамотрицательных кокков и палочек осталась.

Кроме их устойчивости к дезинфицирующим средствам, постоянное нахождение госпитальной флоры среди лекарств также привело к их «знакомству» с антибиотиками с не очень нужной людям стороны: развитию лекарственной устойчивости. В настоящее время вылечить госпитальную инфекцию достаточно сложно, для этого нужно комбинировать антибиотики различных групп, и держать наготове антибиотики резерва.

В заключение нужно отметить, что заражение человека различными возбудителями из рода условно – патогенных микроорганизмов, чаще всего происходит при выраженном снижении иммунитета, при хронических заболеваниях, а также при ВИЧ – инфекции. Поэтому длительно и часто болеющие простудными, гнойничковыми и воспалительными заболеваниями пациенты должны обратить внимание на состояние иммунной системы, чтобы избежать неприятного знакомства с условно – патогенной флорой.

Семейство Neisseriaceae названо в честь А. Нейссера, впервые обнаружившего в 1879 г. возбудителя гонореи. К семейству Neisseriaceae в настоящее время отнесены четыре рода: Neisseria, Moraxella, Acinetobac- ter и Kingella.

Род Neisseria включает 14 видов, в том числе два патогенных: N. meningitidis (менингококк) - возбудитель менингококковых инфекций и N. gonorrhoeae (гонококк) - возбудитель гонореи (табл. 17). Остальные представители этого рода (N. sicca, N. flavescens, N. mucosa, N. lacta- matica и др.) являются сапрофитами и обитают на слизистой оболочке верхних дыхательных путей человека. Типовой вид рода - N. gonor- rhoeae.

Таблица 17

Патогенные бактерии рода Neisseria и их свойства

	Источник	Основные	Основной способ
	заболевания	заболевания	заражения
		Менингококкцемия (ме- нинкогокковый сепсис), менингококковый менингит (гнойное воспаление мозговых оболочек спинного и головного мозга)	Возду шно-капельный
		Гонорея (инфекционное венерическое заболевание с воспалительными проявлениями в мочеполовых органах)	Половой, возможно инфицирование плода при прохождении через родовые пути матери; отмечены случаи заражения через предметы обихода

Представители рода Neisseria являются сферическими, формирующими пары или скопления бактериями, размером 0,6-1,0 мкм. Благодаря делению в двух плоскостях бактерии некоторых видов образуют тетрады. Неподвижны, некоторые виды имеют капсулу и фимбрии (ворсинки). Эндоспоры не образуются. Представители некоторых видов рода Neisseria синтезируют зеленовато-желтые каротиноидные пигменты.

Нейссерии - хемоорганотрофы, каталазоположительные (за исключением N. elongata) и оксидазоположительные. Патогенные нейссерии не растут на обычных питательных средах, но хорошо культивируются на средах, содержащих цельную кровь, сыворотку, асцитическую жидкость. Непатогенные виды менее прихотливы. Каждый вид нейссерий избирательно ферментирует углеводы с образованием уксусной кислоты. Установлено, что представители видов N. gonorrhoeae и N. meningitidis способны расщеплять глюкозу по пентозофосфатному пути и пути Энтне- ра - Дудорова. Большинство представителей рода Neisseria (кроме видов N. gonorrhoeae и N. canis) восстанавливают нитраты. Оптимальная температура для роста 35-37 °С. Величины оптимума рН у различных штаммов варьируют, но для большинства находятся в пределах 6,0-8,0.

Основными факторами вирулентности патогенных бактерий N. go- norrhoeae является продукция эндотоксинов, а также наличие ворсинок, с помощью которых осуществляются адгезия и колонизация эпителиальных клеток слизистой оболочки мочеполовых путей. Экзотоксины у гонококков не обнаружены.

Основным фактором вирулентности патогенных менингококков можно считать образование полисахаридной капсулы, защищающей их от различных воздействий, в первую очередь от поглощения фагоцитами. Факторами, способствующими адгезии и колонизации, являются ворсинки и белки наружной мембраны, факторами инвазивности - гиалурони- даза и другие ферменты, деполимеризующие субстраты ткани хозяина. Токсичность менингококков обусловлена наличием у них липополисаха- ридов, которые обладают пирогенным, некротическим и летальным действием. В качестве факторов вирулентности можно рассматривать и наличие у них таких ферментов, как нейраминидаза, плазмокоагулаза, некоторых протеаз, фибринолизина, а также проявление гемолитической и антилизоцимной активности.

Род Acinetobacter включает в себя грамотрицательные палочки, обычно очень короткие и округлые, размеры их в логарифмической фазе роста составляют 1,0-1,5 х 1,5-2,5 мкм. В стационарной фазе роста они приобретают преимущественно форму кокков, располагающихся парами или в виде коротких цепочек. Спор не образуют, жгутиков не имеют. Аэробы; метаболизм чисто дыхательного типа с использованием молекулярного кислорода в качестве конечного акцептора электронов. Оптимальная температура для роста 30-32 °С, рН около 7,0. Акинетобактерии являются свободно живущими сапрофитами, распространены повсеместно, их часто выделяют из почвы, воды, сточных вод, загрязненных пищевых продуктов, со слизистых оболочек животных (включая рыб) и людей. Они могут быть причиной многих инфекционных процессов, включая менингиты и септицемии у людей и септицемии и аборты у животных.

Род Acinetobacter включает шесть видов, типовой вид - A. calcoaceti- cus.

Род Kingella включает три вида, типовой вид - K. kingae. Клетки кокковидные или короткие палочки с закругленными или квадратно очерченными концами, в парах и иногда коротких цепочках. Жгутиков не имеют. Аэробы или факультативные анаэробы. Оптимальная температура для роста 33-37 °С. Хемоорганотрофы. Сбраживают глюкозу и ограниченное число углеводов с образованием кислоты, но не газа. Кингеллы наиболее часто выделяют из глоточной слизи, а также со слизистых оболочек мочеполовых путей, носа, из абсцессов при повреждении костей, заболевании суставов и т. п. Основным местом обитания кингелл являя- ется слизистая оболочка глотки. Патогенность для человека выясняется.

Семейство Mycobacteriaceae содержит один род - Mycobacterium. Микобактерии - это кислото- и спиртоустойчивые, аэробные, хемоорга- нотрофные, неподвижные, неспорообразующие, грамположительные прямые или изогнутые палочковидные бактерии. Иногда они образуют (особенно в старых культурах) нитевидные или мицелиальные структуры, фрагментирующиеся при легком механическом воздействии на палочки или кокковидные элементы. Кислотоустойчивость микобактерий объясняется высоким содержанием в клеточных стенках особых липидов - миколовых кислот, связанных с пептидогликано-арабиногалакта- новым комплексом. Миколовые кислоты - это разветвленные 3-гид- роксикисло-ты, которые в положениях 2 и 3 замещены алифатическими цепями. В миколовых кислотах микобактерий 78-95 атомов углерода и установлено, что только кислоты с очень длинными цепями придают клеткам кислотоустойчивость. Содержание липидов и восков в микобактериях может составлять до 60 % сухого остатка клеток. Некоторые виды микобактерий синтезируют каротиноидные недиффундирующие в среду пигменты. Микобактерии растут на питательных средах медленно или очень медленно; видимые колонии появляются через 14-40 суток при оптимальной температуре. Колонии часто розовые, оранжевые или желтые, особенно при росте на свету; поверхность колоний обычно матовая или шероховатая. Представители некоторых видов микобактерий требовательны к составу среды, нуждаются в специальных добавках к среде (например, M. paratuberculosis) или не поддаются культивированию (M. leprae). Многие из них могут хорошо расти на средах с парафинами, ароматическими и гидроароматическими углеводородами. Каталазопо- ложительные, арилсульфатазоположительные, устойчивые к лизоциму.

Микобактерии широко распространены в природе: они встречаются в почве, воде, в организме теплокровных и холоднокровных животных. Род Mycobacterium включает более 40 видов. Среди микобактерий есть сапрофитные, условно-патогенные (потенциально патогенные) и патогенные виды. Патогенные микобактерии вызывают заболевания, получившие общее название микобактериозов. К патогенным или потенциально патогенным относятся 24 вида микобактерий, но основные патогены человека - M. tuberculosis, M. bovis и M. leprae (табл. 18).

Таблица 18

Основные патогенные для человека микобактерии и их свойства

	Резервуар	Основные заболевания	Возможность передачи от человека человеку	Основной способ заражения
		Туберкулез		Воздушно-капельный и воздушно-пылевой, реже через кожу и слизистые оболочки, иногда возможно трансплацентарное инфицирование плода
	Животные	Туберкулез		При контакте с больными животными, при употреблении сырого молока или плохо обработанного мяса
				При непосредственном контакте с больным человеком, а также воздушно-капельным путем

Патогенность туберкулезных микобактерий определяется не синтезом экзотоксинов, а связана с высоким содержанием липидов в их клетках. Входящие в состав липидов фтиоидная, миколовая и другие жирные кислоты оказывают своеобразное токсическое действие на клетки ткани макроорганизма. Например, фосфатидная фракция, наиболее активная из всех липидов, обладает способностью вызывать в нормальном организме специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидных клеток, жировая фракция - туберкулоидной ткани. Эти свойства указанных липидных фракций связаны с наличием в их составе фтиоидной кислоты. Восковая фракция, содержащая миколовую кислоту, вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток. Таким образом, с липидами, состоящими из нейтральных жиров, восков, стеринов, фосфати- дов, сульфатидов и содержащими такие жирные кислоты, как фтиоидная, миколовая, туберкулостеариновая, пальмитиновая и другие, связаны патогенные свойства туберкулезных палочек. Однако главным фактором вирулентности является токсический гликолипид (корд-фактор), который располагается на поверхности и в толще клеточной стенки. По химической природе он представляет собой полимер, состоящий из одной молекулы дисахарида трегалозы и связанных с ней в эквимолярных соотношениях высокомолекулярных жирных кислот (С186Н366О117). Корд-фактор не только оказывает токсическое действие на ткани, но и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфори- лирование в митохондриях макрофагов и вызывая их гибель.

Факторы патогенности бактерий, вызывающих проказу (M. leprae), определяются также химическим составом их клеток; продукции экзотоксинов не установлено.

Пропионовокислые бактерии объединены в род Propionibacterium, который входит в состав семейства Propionibacteriaceae.

В целом пропионовокислые бактерии характеризуются как грампо- ложительные, каталазоположительные, неспорообразующие, неподвижные, факультативные анаэробы или аэротолератные. Клетки часто булавовидной формы с одним концом закругленным и другим суженным; некоторые клетки могут быть кокковидными, раздвоенными или разветвленными, но нитчатые формы отсутствуют. Расположение клеток одиночное, в парах, коротких цепочках, V- или Y-конфигурациях, а также группами в виде «китайских иероглифов».

Бактерии содержат менахиноны, С15-насыщенную жирную кислоту мембранных липидов и образуют пропионовую кислоту при брожении, откуда и получили свое название. В слабоаэрируемых условиях пропио- новокислые бактерии могут осуществлять аэробное дыхание. Содержание ГЦ-пар в ДНК 53-67 %. Оптимум температуры для роста 30-37 °С. Формируют колонии кремового, желтого, оранжевого, красного, коричневого цвета.

На основании высокой степени гомологии нуклеотидных последовательностей 16Б-рРНК в род Propionibacterium включены три подгруппы пропионовых бактерий: классические, кожные и Propionibacterium pro- pionicus.

Классические бактерии обитают главным образом в молоке, сырах (отсюда и другое название - молочные пропионовые). Кожные бактерии обитают на коже людей, в рубце жвачных животных. Их рассматривают как биологическую защиту человека и полезную естественную микрофлору рубца животных. Они усиливают иммуностимулирующие реакции у людей, благотворно влияют на сельскохозяйственных животных и птиц, и поэтому нашли применение как компоненты лечебных и профилактических препаратов. Кожные пропионовые бактерии живут не только на поверхности нормальной кожи людей, их выделяют также из угрей, реже из содержимого желудка, ран, крови, гнойных и мягких тканевых абсцессов, хотя вопрос о причастности этих бактерий к возникновению заболеваний утвердительного ответа не имеет. Таким образом, классические и кожные пропионовые бактерии различаются, прежде всего, по характерным местам их обитания в природе. Кроме того, классические пропионовые бактерии, в отличие от кожных, не образуют индола и не способны к гидролизу желатины.

Третья подгруппа пропионовокислых бактерий включает только один вид - Propionibacterium propionicus. Бактерии этого вида обитают в почве.

К классическим пропионовокислым бактериям относятся четыре вида: P. freudenreichii, P. thoenii, P. jensenii, P. acidipropionici.

К кожным пропионовокислым бактериям относятся три вида: P. acnes, P. avidum, P. granulosum.

Типовой вид - Propionibacterium freudenreichii.

Синтетические способности пропионовокислых бактерий хорошо развиты, хотя и различаются у разных видов и штаммов. Установлено, что некоторые пропионовокислые бактерии способны фиксировать молекулярный азот, использовать углеводороды, самостоятельно синтезировать витамины. Все пропионовокислые бактерии синтезируют витамин В12, принимающий участие в брожении, синтезе белка, ДНК, в регуляции синтеза ДНК и некоторых других реакциях.

Продукты, выделяемые бактериями при брожении: пропионовую и уксусную кислоты, а также биомассу бактерий, широко применяют на практике. В зависимости от целей производства используют энзиматиче- ски неактивную или энзиматически активную биомассу.

Энзиматически неактивная биомасса применяется в животноводстве как белок одноклеточных организмов, богатый у пропионовокислых бактерий серосодержащими аминокислотами, особенно метионином, а также треонином и лизином, витаминами группы В. В корм животных рекомендуют добавлять биомассу бактерий P. freudenreichii, положительный эффект которой обусловлен обогащением корма микроэлементами, находящимися в биологически активной форме, витаминами и белком. Биомасса неживых (термически обработанных) бактерий служит источником витамина В12, поскольку он выдерживает нагревание. Убитые нагреванием кожные бактерии (P. acnes и P. granulosum) рекомендованы для производства иммуностимулирующего препарата. Показано, что эти бактерии стимулируют образование антител, обладают антивирусными и антибактериальными свойствами. Кроме того, в ряде лабораторий установлено, что бактерии P. acnes способны замедлять рост различных (включая злокачественные) опухолей, а также инвазию опухолей за счет усиления защитных реакций организма. Еще более поразительный факт заключается в том, что P. acnes ингибирует распространение метастазов в организме. Иммунотерапия рака наиболее эффективна после операций, поскольку при этом удаляются источники диссимиляции опухолевых клеток, а также при химиотерапевтической ремиссии лейкемии. Наблюдения проводились не только на животных, но и на людях: они подтвердили безопасность убитых P. acnes для клинического применения.

Убитые бактерии P. granulosum являются источником порфиринов. Порфирины и металлокомплексы используют как красители и пигменты, включая красители для пищевых целей, как катализаторы реакций окисления-восстановления; катализаторы реакций окисления углеводородов, меркаптанов в нефти, нефтепродуктах и т. д. Они могут применяться как диагностические и лечебные препараты.

заквасок для сыроделия. Твердые сычужные сыры, в изготовлении которых обязательно принимают участие пропионовокислые бактерии, производят повсеместно;

витамина В12. Витамин В12 с использованием ферментации про- пионовокислых бактерий выпускают в России, Великобритании, Венгрии и других странах мира. Производство витамина В12 методом химического синтеза практически невозможно;

заквасок для хлебопечения. Пропионовокислые бактерии, наряду с дрожжами и молочнокислыми бактериями, вводят в некоторые закваски для теста с целью образования в процессе ферментации, помимо молочной и уксусной кислот, еще и пропионовой. Такой хлеб содержит до

28 % пропионовой кислоты, срок его хранения увеличивается в связи с ингибирующим действием пропионовой кислоты на рост плесневых грибов. Кроме того, такой хлеб обогащен витамином В12; это особенно важно для вегетарианцев и лиц, страдающих различными заболеваниями, причиной которых служит дефицит витамина В12 в организме;

заквасок для силосования кормов;

пропионовой кислоты как фунгицида. Известно, что вредители уничтожают 15 % мирового урожая во время хранения. При влажности более 14 % зерно начинает нагреваться и плесневеть. Такие способы сохранения зерна, как его сушка, хранение при низкой температуре или в герметических условиях, в реальной жизни трудно достигаемы. Но существует еще один способ, который уже применяется в некоторых странах, предусматривающий обработку (опрыскивание) зерна слабым раствором (0,5-1,0 %) пропионовой кислоты. Пропионовая кислота останавливает рост семян, убивает микроорганизмы, и прежде всего плесневые грибы. Питательные качества такого корма повышаются, а вероятность заболевания животных микозом и микотоксикозом снижается.

Кроме того, энзиматически активную биомассу пропионовокислых бактерий можно использовать для обессахаривания белка куриных яиц. Эта проблема возникла в связи с хранением сухого яичного белка. В свежем белке имеется активный лизоцим, обладающий бактерицидным действием, однако в процессе хранения активность его снижается и белок становится уязвимым для многих, прежде всего гнилостных бактерий, вызывающих порчу. Вследствие накопления продуктов разложения и окислительных процессов белок оказывается непригодным для употребления в пищу. Предложен способ консервации белка с использованием пропионовокислых бактерий. Он основан на их способности расти в жидком курином белке, сбраживая за 24 ч углеводы с образованием консервантов пропионовой и уксусной кислот.

Коринеформные бактерии - сводная группа грамположительных неспорообразующих палочковидных бактерий неправильной формы. В состав группы входят следующие роды: Corynebacterium, Arthrobacter, Bre- vibacterium, Cellulomas, Clavibacter, Microbacterium и др.

К роду Corynebacterium относятся бактерии с булавовидной формой клеток (от греч. coryne - булава). В развивающейся культуре одновременно могут находиться клетки палочковидной, конусообразной и булавовидной формы. Размеры клеток 0,3-0,8 х 1,5-8,0 мкм. Неподвижны. Помимо плеоморфизма, для представителей этого рода характерно «защелкивание» клеток при их делении. Оно происходит из-за того, что соединяющая дочерние клетки перегородка расслаивается на разных сторонах с разной скоростью, так что клетки оказываются под углом друг к другу (V-сочетания клеток). Некислотоустойчивые. Внутри клеток, как правило, образуются метахроматиновые гранулы полиметафосфата. В клеточной стенке имеются арабиногалактановый полимер и мезо-диами- нопимелиновая кислота, а также специфические липиды - эфиры кори- номиколовой и кориномиколеновой кислот, димиколат трегалозы, фосфаты маннозы и инозита.

Коринебактерии - аэробы и факультативные анаэробы, хемооргано- трофы. Метаболизм смешанный - бродильный и дыхательный. Основным продуктом при сбраживании углеводов является пропионовая кислота. Большинство представителей коринебактерий имеют сложные пищевые потребности и нуждаются в витаминах группы В и биотине. На питательных средах формируют в основном пигментированные колонии (желтые, розовые, коричневые и др.).

Род Arthrobacter представлен палочковидными бактериями неправильной формы варьирующих размеров (0,8-1,2 х 1,0-8,0 мкм), образующими клетки различных сочетаний (V-, Y- и др.) и с булавовидными концами, но нити отсутствуют. Для артробактерий характерен цикл развития: кокк - палочка - кокк. Старые культуры полностью или главным образом состоят из кокковидных клеток (диаметр 0,6-1,0 мкм), которые образуются при распадании палочковидных бактерий. При посеве культуры в свежую питательную среду происходит прорастание кокковидных клеток. Прорастание осуществляется путем образования ростков, которых может быть от одного до четырех на клетку. У большинства артробактерий полный цикл развития (кокк - палочка - кокк) завершается в течение 1-2 суток.

Артробактерии - грамположительные, но легко обесцвечиваются. Некислотоустойчивые, неспорообразующие. Представители некоторых видов подвижны благодаря наличию жгутиков. По составу клеточной стенки отличаются от коринебактерий. Они не имеют арабиногалактана и миколовых кислот. Характерными аминокислотами клеточной стенки являются лизин или Ь,Ь-диаминопимелиновая кислота.

Аэробы. Хемоорганотрофы. Метаболизм дыхательный, никогда не бывает бродильным. Многие виды нуждаются в факторах роста: биотине, тиамине, пантотеновой кислоте. Целлюлозу не гидролизуют, катала- зоположительные. Температурный оптимум для роста 25-30 °С. Оптимум рН для роста 7,0-8,0.

Бактерии рода АНкгоЬа^вг являются одной из основных групп микроорганизмов, обитающих в различных почвах земного шара, а также в ризосфере растений. Их находят в воде и горных породах, торфе, кишечном тракте животных, в производственных и пищевых субстратах.

Обладая значительным набором ферментов, артробактерии активно участвуют в круговороте веществ в природе, осуществляя процессы аммонификации и нитрификации, фиксации атмосферного азота и превращения труднодоступных для других микроорганизмов веществ: пластмасс, углеводородов, пестицидов, алкалоидов, лигнина и т. д.

Многообразна биосинтетическая деятельность артробактерий. Они активно продуцируют аминокислоты, витамины, ауксины, внеклеточные полисахариды и пигменты; широко используются в микробиологической промышленности как продуценты органических кислот (лимонной и пантоевой), производных и предшественников нуклеиновых кислот (5- пуриннуклеотида, 6-азаурацилрибонуклеотида, НАД, гуанин-5-моно- фосфата, оротидиловой кислоты, ксантина), свободных аминокислот (гистидина, изолейцина, серина, триптофана, треонина, фенилаланина), протеолитических ферментов.

Описано 30 видов бактерий рода АнИгоЬа^вг. Типовой вид - АНкго- Ьа^вг gloЬiformis.

Бактерии рода БгвуМаМвгшт в молодых культурах представлены палочками неправильной формы (0,6-1,2 х 1,5-6 мкм), одиночными или в парах и часто расположенными У-образно. Может встречаться ветвление, но мицелий не образуется. В старых культурах палочки распадаются на мелкие кокки.

Бревибактерии - грамположительные, но легко обесцвечиваются, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые. В их клеточной стенке имеется БЬ-диаминопимелиновая кислота, но отсутствуют ара- биногалактановый полимер и миколовые кислоты.

Это облигатные аэробы, хемоорганотрофы, каталазоположительные. Метаболизм дыхательного типа. На агаризованных питательных средах формируют желто-оранжевые, серые или пурпурные колонии. Оптимальная температура для роста 20-35 °С. Многие представители бреви- бактерий являются продуцентами биологически активных веществ (аминокислот, внеклеточных белков).

Бревибактерии экологически связаны со специфическими органическими субстратами - молочными продуктами, кожей рыб, пометом домашних птиц и т. д. Кроме того, они обнаруживаются на коже человека.

Род Brevibacterium включает четыре вида: B. casei, B. epidermidis, B. iodinum, B. linens. Типовой вид - B. linens. Это соленоустойчивые микроорганизмы. Наиболее часто их можно обнаружить на поверхности мягких сыров, на коже морских рыб, на помете домашних птиц и в морской воде. Бактерии данного вида зависимы в витаминах группы В, колонии имеют желто-оранжевую пигментацию.

Род Cellulomas - гетерогенная группа бактерий, утилизирующих целлюлозу. В молодых культурах бактерии этого рода представляют собой палочки неправильной формы (0,5-0,6 х 2,0-0,5 мкм). Они могут быть прямыми, угловатыми, слегка изогнутыми, а иногда булавовидными или располагаться в форме буквы V. В экспоненциальной фазе роста могут быть нитеобразными и могут давать первичные ответвления, но мицелий не образуют. В более старых культурах часть клеток может быть кокковидной. Однако для бактерий рода Cellulomas не характерен цикл кокков. Клетки некоторых представителей передвигаются с помощью одного полярного или нескольких латеральных жгутиков. Обнаружены и неподвижные представители. Эндоспор не образуют. Грамполо- жительные; клетки легко обесцвечиваются, и часто в культуре наблюдается смесь грамположительных и грамотрицательных палочек. Некислотоустойчивые. Клеточные стенки не содержат мезо-диаминопимелино- вой кислоты, арабиногалактанового полимера и миколовых кислот.

Факультативные анаэробы. Хемоорганотрофы, обладающие и дыхательным, и бродильным типом метаболизма с образованием кислоты из глюкозы и различных других углеводов в аэробных и в анаэробных условиях. Каталазоположительные. Восстанавливают нитраты до нитритов. При росте на агаризованной среде с пептоном и дрожжевым экстрактом образуют выпуклые желтые колонии. Оптимальная температура для роста 30 °С. Хорошо растут при нейтральных значениях рН. Для роста нуждаются в биотине и тиамине.

Бактерии рода Cellulomas широко распространены в почвах, отходах бумажной промышленности, гниющем растительном материале.

Род Cellulomas представлен восемью видами. Типовой вид - Cellulomas fla-vigena.

Бактерии рода Clavibacter выделены из рода Corynebacterium. Этот род объединяет виды аэробных фитопатогенных бактерий, клеточная стенка которых содержит 2,4-диаминомасляную кислоту, а не мезо-диа- минопимелиновую, как у бактерий других видов рода Corynebacterium.

Кроме того, в клеточной стенке бактерий Clavibacter не содержатся ми- коловые кислоты и арабиногалактановый полимер.

Бактерии рода Clavibacter представлены прямыми или слегка изогнутыми тонкими палочками (0,4-0,75 х 0,8-2,5 мкм) неправильной формы и часто клино- или булавовидной формы, преимущественно одиночными или в парах V-образной конфигурации. В старых культурах обнаруживаются кокковидные клетки, но цикл «палочки - кокки» не характерен.

Грамположительные, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые.

Бактерии рода Clavibacter относятся к облигатным аэробам и хемо- органотрофам. Метаболизм дыхательного типа с образованием небольшого количества кислоты из глюкозы и некоторых других углеводов. Ка- талазоположительные, оксидазоотрицательные, индол не образуют, нитраты не восстанавливают. Оптимальная температура для роста 20-29 °С; в редких случаях растут при температуре выше 35 °С. Нуждаются в богатых питательных средах, растут медленно. Некоторые штаммы синтезируют желтый или голубой пигмент.

Род Clavibacter представлен пятью видами: C. iranicus, C. michi- ganensis, C. rathayi, C. tritici, C. xyli. Типовой вид - C. michiganensis (возбудитель бактериального рака томатов).

К роду Microbacterium относятся тонкие палочковидные бактерии неправильной формы (0,4-0,8 х 1,0-4,0 мкм), одиночные или в парах V-образной конфигурации. Первичное ветвление нетипично, и мицелий не образуется. В старых культурах палочки короче, но четкий цикл «палочка - кокки» отсутствует. Грамположительные, некислотоустойчивые, неспорообразующие. В клеточной стенке имеется лизин, но отсутствуют миколовые кислоты и арабиногалактановый полимер. Неподвижные или подвижные за счет одного-трех жгутиков.

Бактерии рода Microbacterium - аэробы, хемоорганотрофы. Метаболизм в основном дыхательного типа, но может быть и слабо выраженный бродильного типа. Каталазоположительные. Требуют для роста витамины группы В и некоторые аминокислоты. На агаризованной среде с дрожжевым экстрактом, пептоном и глюкозой формируют непросвечивающие, блестящие, часто с желтоватой пигментацией колонии. Оптимальная температура для роста около 30 °С. Не растут при 18 и 40 °С. Выдерживают нагревание при 72 °С в течение 15 мин в обезжиренном молоке.

Обнаружены в молоке, молочных продуктах, на оборудовании молочных предприятий, в сточных водах и у насекомых.

Род Microbacterium включает четыре вида: M. arborescens, M. imperiale, M. lacticum, M. laevaniformans. Типовой вид - M. lacticum.

Актиномицеты относятся к порядку Actinomycetales, в который входят бактерии, имеющие тенденцию к образованию ветвящихся гиф, способных развиваться в мицелий. Гифы могут быть очень короткими или хорошо развитыми и в связи с этим мицелий может быть плотным, субстратным, врастающим в питательную среду или же рыхлым, воздушным на поверхности колонии. Различают мицелий стабильный и распадающийся на палочковидные или кокковидные элементы, некоторые из них обладают подвижностью за счет жгутиков. Мицелий может нести интеркалярные везикулы, не содержащие спор либо содержащие многочисленные споры. Кроме того, для актиномицетов характерно образование конидий (бесполых спор), которые похожи на бактериальные эндоспоры и служат для перенесения неблагоприятных условий внешней среды. Характер расположения конидий у разных групп актиномицетов отличается. Это могут быть одиночные конидии, пары конидий, короткие или длинные цепочки конидий, конидиенесущие гифы, соединенные в пучки гиф, из которых высвобождаются подвижные споры.

Еще одним морфологическим критерием, который используется для идентификации актиномицетов, является образование спорангиев - мешков, содержащих споры. Они могут образовываться на хорошо развитых воздушных гифах или на поверхности конидий со слабо развитым воздушным мицелием либо без него, либо главным образом в толще агара (рис. 101).

Рис. 101. Схематическое изображение мицелиального роста и спорообразования

у актиномицетов различных родов (из «Todar"s Online Textbook of Bacteriology»;

Кроме морфологических критериев, для идентификации актиномице- тов используются данные о химической структуре некоторых соединений:

типе двухосновной аминокислоты, присутствующей в составе клеточной стенки (мезо- или L-диаминопимелиновая кислота);

типе диагностических сахаров, содержащихся в гидролизате целых клеток.

Культуры актиномицетов по окраске делятся на две группы: бесцветные и пигментированные. Первые при росте на питательных средах не образуют никаких пигментов, колонии их бесцветные, беловатые. Акти- номицеты второй группы образуют пигменты, поэтому формируют окрашенные колонии: синие, фиолетовые, красные, розовые, желтые, оранжевые, зеленые, коричневые, черные (рис. 102, 103).

Рис. 102. Пигментация у различных видов актиномицетов

Рис.103. Колонии бактерий Streptomyces coelicolor (из «Hinger Education and Research Opportunitie, the John Innes Centre»;

Многие актиномицеты могут синтезировать одновременно несколько пигментов, причем на разных средах в различных количественных соотношениях. Пигменты актиномицетов разнообразны по своим химическим и физическим свойствам. Одни из них хорошо растворяются в воде и этиловом спирте, другие не растворяются в воде, но растворяются в спирте, эфире и других органических растворителях. Третьи не растворяются ни в воде, ни в органических растворителях.

Актиномицеты - грамположительные организмы, хотя реакция по Граму может изменяться с возрастом культуры. Большинство аэробы, но некоторые роды представлены факультативными или облигатными анаэробами. Хемоорганогетеротрофы, использующие разнообразные источники энергии: углеводы, органические кислоты, спирты, крахмал, декстрин, клетчатку, различные углеводородные соединения (парафин и другие продукты переработки нефти), жиры, воски, лигнин, хитин и др. В большинстве случаев встречаются как свободноживущие в разнообразных местообитаниях. Однако есть актиномицеты, которые образуют симбиотические азотфиксирующие ассоциации с растениями (род Frankia).

Встречаются чаще в почве и реже - в пресной воде. Есть патогенные для человека, животных и растений виды. Споры могут быть аллергенными для человека.

По морфологическим и химических критериям актиномицеты в девятом издании «Определителя бактерий Берджи» разделены на восемь групп родов.

Нокардиоформные актиномицеты.

Роды с многогнездными спорангиями.

Актинопланы.

Стрептомицеты и близкие роды.

Мадуромицеты.

Thermomonospora и близкие виды.

Thermoactinomyces.

Другие роды.

Нокардиоформные актиномицеты. Это гетерогенная группа, многие представители которой образуют нити мицелия, распадающиеся на более короткие элементы. Для некоторых родов характерно образование воздушного мицелия с цепочками спор. Подразделение на роды основано в первую очередь на хемотипе клеточной стенки, присутствии или отсутствии миколовых кислот и других химических признаках. Эта группа актиномицетов разделена на четыре погруппы:

Pseudonocardia и близкие роды;

Nocardioides и Terrabacter;

Promicromonospora и близкие роды.

Бактерии, содержащие миколовые кислоты, широко распространены в природе, особенно в почве, однако некоторые виды ассоциированы с животными. В эту подгруппу входят четыре рода: Gordona (выделяются из почвы, мокроты больных легочным туберкулезом); Nocardia (широко распространены и обильно представлены в почве. Некоторые являются возбудителями актиномицетной мицетомы и нокардиоза); Rhodococcus (широко распространены; особенно обильно предсталены в почве и помете травоядных животных. Некоторые представители патогенны для человека и животных); Tsukamurella (выделены из почвы, мокроты человека, а также из мицетом и яичников постельных клонов. Некоторые представители известны как возбудители легочной инфекции, менингита с летальным исходом и некротирующего тендовагинита).

Подгруппа Pseudonocardia и близкие роды выделяются из разнообразных местообитаний, чаще всего из почвы и растительного материала; некоторые виды вызывают аллергические заболевания. Подгруппа включает 10 родов бактерий.

Подгруппа Nocardioides и Terrabacter состоит из двух родов бактерий: Nocardioides и Terrabacter. Встречаются в почве.

Подгруппа Promicromonospora и близкие роды выделяются из почвы и растительного материала. Включает три рода: Jonesia, Oerskovia и Promicromonospora.

Роды с многогнездными спорангиями. Для актиномицетов этой группы типично образование нитей мицелия, делящихся в продольном и поперечном направлениях, и большого числа кокковидных элементов, которые могут быть подвижными или неподвижными. В эту группу входят три рода:

Frankia - большинство штаммов - симбионты ряда покрытосеменных растений, индупируютие образование клубеньков на корнях соответствующих хозяев. Встречаются и как свободноживущие в почве;

Geodermatophilus - местообитание почва.

Актинопланы. Представлены бактериями, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты; воздушный мицелий развит слабо или отсутствует. Они образуют подвижные или неподвижные споры в спорангиях, одиночные либо в цепочках. Клеточные стенки содержат мезо-диамино- пимелиновую кислоту и глицин, в гидролизатах целых клеток присутствуют арабиноза и ксилоза. Местообитание - почва, разлагающийся растительный материал, пресная и морская вода, ил. Группа включает шесть родов: Actinoplanes, Ampullariella, Catellaspora, Dactylosporangium, Mi- cromonospora, Pilimelia.

Стрептомицеты и близкие роды. Это гетерогенная группа, для всех таксонов которой характерны клеточные стенки, содержащие L-диами- нопиколиновую кислоту и глицин. Нити мицелия не распадаются на фрагменты и могут образовывать обильный воздушный мицелий с длинными цепочками спор (роды Streptomyces и Streptoverticilium) (рис. 104). Для других родов (Intrasporangium, Kineosporia, Sporichthya) характерно слабое развитие воздушного мицелия либо полное его отсутствие и разнообразные по форме споры.

Рис. 104. Филаменты мицелия бактерий рода Streptomyces (из «Natural Resources Conservation Service»; )

В группу входит пять родов: Streptomyces, Streptoverticillium, Intrasporangium, Kineosporia, Sporichthya. Основное местообитание представителей этих родов - почва, но есть патогенные для человека и животных или растений виды. Типовой род - Streptomyces. Все стрептомицеты - облигатные аэробы. Они нетребовательны к питательным субстратам, не нуждаются в факторах роста, преимущественно сапрофиты. Стрептомицеты широко распространены в почвах разных типов и играют большую роль в минерализационных процессах. Их наличие обусловливает специфический запах свежевспаханной почвы. Из стрептомицетов Str. gri- seus было выделено масло, названное геосмином, обладающее таким запахом. Стрептомицеты хорошо развиваются при низкой влажности почвы, поэтому в почвах засушливых климатических зон они численно преобладают над всеми микроорганизмами.

Повсеместное распространение актиномицетов рода Streptomyces связано с наличием у них активных ферментных систем, позволяющих разрушать и использовать самые разнообразные соединения. Так, у актино-
мицетов выявлена способность продуцировать такие гидролитические ферменты, как протеазы, амилазы, кератиназы, хитиназы, активные окислительно-восстановительные ферменты группы полифенолоксидаз, обес-печивающие расщепление устойчивых фенольных соединений, входящих в состав гумуса. Некоторые актиномицеты осуществляют трансформацию полициклических соединений - стероидов - в биологически активные соединения - стероидные гормоны (преднизолон, кортизон). Среди актиномицетов особенно много продуцентов антибиотиков. Например, Str. aureofaciens- продуцент тетрациклина, Str. griseus - продуцент стрептомицина, Str. venezuelae - продуцент хлорамфеникола и др. Одновременно с образованием тетрациклина бактерии вида Str. aureofaciens синтезируют также витамин В12 и его аналоги. Витамины группы В способны продуцировать почти все стрептомицеты. Многие из них образуют каротиноидные пигменты, черно-коричневые меланины и синефиолетовые антоцианы.

Среди фитопатогенных представителей рода Streptomyces следует отметить бактерии вида Str. scabies, которые являются возбудителями парши картофеля. Парша картофеля проявляется в образовании уплотненных слоев на поверхности клубней, ухудшении свойств, связанных с пищевой ценностью (рис. 105). Возбудитель поражает только клубни и неактивен в отношении зеленых частей растения. Вирулентность этих бактерий связана с наличием кутиназы, которая гидролизует полимер защитного кутикулярного слоя. Показано, что стрептомицеты, вызывающие паршу картофеля, могут подавлять образование фитоалексинов в клубнях. Фильтраты культуральной жидкости бактерий Str. scabies ингибируют дыхание клубней картофеля.

Рис. 105. Клубни картофеля, пораженные бактериями Streptomyces scabies (из «Vegetable MD Online»;

воздушный мицелий, несущий споры. Клеточные стенки содержат мезо- диаминопимелиновую кислоту, а гидролизаты целых клеток мадурозу. Эта группа разделена на две подгруппы:

Streptosporangium и родственные таксоны;

Мадуромицеты - в основном почвенные микроорганизмы, но среди них встречаются патогенные для человека и животных виды.

ТквгтотопоБрога и близкие виды. Представлены бактериями, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты и образуют воздушный мицелий со спорами, расположенными одиночно (род Thermотоno- nospora), в цепочках (роды Actinosynnema, Nocardiopsis) или в спорангиеподобных структурах (род Streptoalloteichys). Клеточные стенки содержат мезо-диаминопимелиновую кислоту; в гидролизатах целых клеток характерные аминокислоты и сахара отсутствуют. Миколовые кислоты также отсутствуют. Основное местообитание - почва.

ТНвгтоасИпотусвБ. Это группа бактерий, нити мицелия которых не распадаются на фрагменты и образуют воздушный мицелий. Одиночные споры (представляющие собой эндоспоры) имеются как на воздушном, так и на субстратном мицелии. Все виды термофильные. Клеточные стенки содержат мезо-диаминопимелиновую кислоту; характерные аминокислоты и сахара отсутствуют. Аэробы; сапрофитные хемоорганотро- фы. Группа представлена только одним родом - Thermoactinomyces.

Другие роды. Эта группа включает три рода: Glycomyces, Kitasatospo- ria, Saccharothrix. Они не могут быть в настоящее время отнесены ни к одной из вышеперечисленных групп. Все представители этих родов образуют воздушный мицелий с цепочками спор. В составе клеточной стенки отсутствуют миколовые кислоты. Аэробы, хемоорганотрофы. Выделены из почвы.

Микоплазмы - это очень мелкие прокариотические организмы, полностью лишенные клеточных стенок. Клетки ограничены только цитоплазматической мембраной и не способны к синтезу пептидогликана и его предшественников. В связи с этим для них характерен ярко выраженный плеоморфизм. В культуре одного вида можно одновременно обнаружить кокковидные, эллипсовидные, дискообразные, палочковидные, грушевидные клетки, а также нитевидные формы. Нити могут ветвиться, образуя структуры, подобные мицелиальным. Диаметр клеток составляет

1-10 мкм. Размножаются различными способами: бинарным делением;

фрагментацией крупных тел и нитей, сопровождающейся освобождением большого числа кокковидных форм; почкованием. Репликация генома предшествует, но не обязательно синхронизована с клеточным делением.

Микоплазмы, как правило, неподвижны, однако некоторые виды обладают способностью к скользящему движению по поверхностям, покрытым жидкостью. Клетки других видов, имеющие форму спиральных нитей, обнаруживают подвижность вращательного, изгибательного и поступательного типов.

Покоящиеся стадии неизвестны.

Отсутствие клеточной стенки обусловливает еще одну отличительную особенность микоплазм - их нечувствительность к антибиотикам, специфически действующим на бактериальную стенку (пенициллину, ампициллину, цефалоспорину и др.).

Микоплазмы представляют собой группу, чрезвычайно разнообразную с точки зрения физиолого-биохимических особенностей. Они могут расти:

на искусственных бесклеточных средах разной степени сложности (от простых минеральных до сложных органических). Большинство видов нуждается для роста в стеринах и жирных кислотах;

только внутри организма-хозяина, откуда их можно выделить с использованием культуры клеток.

Разнообразны также способы получения энергии у микоплазм. Среди них описаны виды, получающие энергию за счет окисления или сбраживания органических соединений, а также за счет окисления неорганических соединений (железа, марганца). Описаны микоплазмы, являющиеся строгими аэробами, хотя большинство из них - факультативные анаэробы. Некоторые микоплазмы - облигатные анаэробы, погибающие в присутствии минимального количества минерального кислорода.

Факторы вирулентности микоплазм, патогенных для человека и животных, разнообразны. Они продуцируют как экзо-, так и эндотоксины; пероксид водорода, нейраминидазу, кислые фосфатазы, уреазу, аргинин- дегидролазу. Ферменты действуют на соответствующие субстраты и обусловливают в силу этого патогенный эффект. Например, аргининде- гидролаза разрушает необходимую для нормальной жизнедеятельности клеток аминокислоту аргинин. Нейраминидаза вызывает изменения рецепторного аппарата клеточных мембран эритроцитов, респираторного эпителия и т. д. Пероксид водорода вызывает повреждения мерцательного эпителия трахеи и бронхов человека и животных.

Первая фаза микоплазменной инфекции основана на способности микоплазм адсорбироваться на клетках хозяина. Это обусловлено общностью рецепторных участков на мембранах разных видов микоплазм и разных типов клеток макроорганизмов. Разные виды микоплазм адсорбируются на эритроцитах, макрофагах, мембранных структурах реснитчатого эпителия трахеи и бронхов человека, крупного рогатого скота, птиц и других организмов. Проникновение микоплазм в клетки происходит редко, т. е. они действуют с поверхности клетки. Конечный эффект взаимодействия микоплазм и клеток организма может выражаться в развитии либо острой инфекции, сопровождающейся видимым изменением, разрушением поражаемых клеток, либо скрытой ее форме - изменяются метаболизм и функции поражаемых клеток, нарушается нормальное клеточное деление, вызываются хромосомные изменения.

Основными факторами патогенности фитопатогенных микоплазм являются токсины, пероксид водорода, аммиак, ферменты (нуклеазы, про- теазы, уреаза и т. д.). Также одним из факторов патогенности принято считать их конкуренцию с клеткой-хозяином за отдельные субстраты энергетического и белкового обменов (углеводы, аминокислоты и т. д.). Так, для большинства аргининусваивающих микоплазм в качестве основного фактора патогенности является их способность усваивать аргинин.

Микоплазмы вызывают такие заболевания, как столбуры (недоразвитость верхушки, усиление ветвления, курчавость листьев, разрастание чашелистиков, позеленение лепестков, увядание и т. п.); желтухи (удлинение междоузлий и пожелтение листьев); «ведьмины метлы» (чрезмерное разрастание пазушных и дополнительных побегов, недоразвитость верхушек); вырождения и др.

Основными заболеваниями, наносящими значительный экономический ущерб, являются микоплазмозы пшеницы, пасленовых, винограда и некоторых древесных культур (яблони, шелковицы и др.). К наиболее распространенным микоплазмозам относятся бледно-зеленая карликовость пшеницы, «ведьмины метлы» картофеля, столбур томатов и др.

По вредоносности микоплазмозы, за небольшим исключением, относятся к катастрофическим заболеваниям. Урожай пшеницы может снизиться на 80-90 %. Большой вред они наносят овощеводству, вызывая потери на 25-38 % урожая плодов томатов и других пасленовых, недобору 18-20 % урожая картофеля.

Микоплазмы широко распространены в основных районах хлебопашества и овощеводства.

Характер взаимодействия микоплазм с мембранами клеток специфических растений-хозяев очень сходен с таковым микоплазм, патогенных или потенциально патогенных для человека и животных. В основе взаимодействия лежит родство рецепторного аппарата микоплазм и клеток. Адсорбировавшиеся на мембранных элементах клеток-хозяев микоплазмы получают возможность извлекать из них необходимые питательные субстраты, а также непосредственно влиять на генетический аппарат клеток хозяина.

Интересен также способ распространения микоплазмозов растений. Если микоплазмы, поражающие человека и животных, распространяются от особи к особи посредством прямых контактов, а у птиц, кроме того, и через яйца, то фитопатогенные микоплазмы являются типичными трансмиссивными патогенами. Для их распространения обязательно нужен переносчик. Основную роль в распространении микоплазмозов растений играют насекомые, главным образом цикадки. Насчитывается свыше 60 видов цикадок-переносчиков микоплазмозов растений. Кроме того, микоплазмы могут передаваться механически - при использовании больного прививочного материала.

Порядок Mycoplasmatales по своим свойствам является гетерогенной группой бактерий, включающей три семейства: Mycoplasmataceae, Acholeplasmataceae и Spiroplasmataceae.

Семейство Mycoplasmataceae представлено двумя родами: Mycoplasma и Ureaplasma. Различия между ними состоят в том, что бактерии рода Ureaplasma обладают уреазной активностью. Все представители данного семейства являются хемоорганогетеротрофами, характеризующимися высокими потребностями в питательных веществах (особенно в холестерине или близких стеринах). Энергетический метаболизм ферментативного или окислительного типа. Использование глюкозы происходит по гликолитическому пути. Некоторые из представителей семейства способны передвигаться путем скольжения.

Грамотрицательные кокки семейства Neisseria: менингококки, гонококки. Возбудители негонококковых урогенитальных инфекций, хламидии, уреаплазмы Кыргызская Государственная Медицинская Академия Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Д. м. н. , проф. Адамбеков Д. А. 1

ПЛАН: 1. Общая характеристика 2. Морфология 3. Культуральные свойства, биохимическая активность 4. Антигенная структура, классификация 5. Факторы патогенности 6. Устойчивость 7. Эпидемиология 8. Патогенез, клиника. 9. Иммунитет. 10. Микробиологическая диагностика. 2 11. Лечение и профилактика.

Нейссерии – грамотрицательные аэробные кокки, относятся к роду Neisseria menibgitisis (мениногококки), Neisseria gonorrhoae (гонококки), Neisseria flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca, N. mucosa, N. flavescens. Обитают на слизистых оболочках человека и млекопитающих; 7 видов встречаются у человека, из них 5 видов являются представителями нормофлоры носоглотки и верхних дыхательных путей. 3

Морфология. Грамоотрицательные неспорообразующие кокки диаметром 0, 6 -1, 0 мкм, неподвижны. Отличаются склонностью к образованию пар и тетрад, связанной с делением клеток в двух плоскостях; обращенные друг к другу поверхности бывают утолщены. 4

5

Культуральные свойства. Аэробы, хемоорганотрофы. Температурный оптимум роста – 35 -37°С, патогенные виды могут расти в интервале температур 24 -41°С, а непатогенные способны к росту при температурах ниже 24°С. Оптимум р. Н 6 -8. патогенные виды прихотливы к условиям культивирования, не растут на обычных питательных средах; непатогенные виды менее прихотливы. 6

Антигенная структура. Все виды нейссерий имеют полисахаридный соматический О-АГ; штаммы, образующие капсулу, также имеют капсульный антиген. Факторы патогенности: капсула, пили, эндотоксин, поверхностные белки наружной мембраны. Патогенными для человека являются менингококки и гонококки. 7

Устойчивость в окружающей среде низкая, поэтому в культурах старше 1 -2 суток практически не содержится живых клеток. Клинический материал транспортируют в лабораторию в утепленных контейнерах при 30 -35°С. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинефектантов. Высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, стрептомицину. 8

Менингококки (Neisseria meningitidis)– вид грамотрицательных диплококков рода Neisseria; вызывают менингококковую инфекцию. Человек – единственный природный хозяин. Путь передачи – воздушно-капельный необходимо дифференцировать патогенные менингококки от других видов нейссерий (N. sicca и N. mycosa), являющихся комменсалами ротоглотки. 9

Менингококковая инфекция – это острое инфекционное заболевание, вызываемое Neisseria meningitidis, которое передается воздушнокапельным путем и характеризуется локальным поражением слизистой оболочки носоглотки с последующей генерализацией в виде менингококковой септицемии (менингококцемия) и воспаления мягких мозговых оболочек (менингококковый менингит) 10

11

Морфология Менингококки – грамотрицательные диплококки (до 1 мкм в диаметре), располагающиеся в виде пары кофейных зерен, обращенных вогнутыми поверхностями друг к другу. Неподвижны. Имеют пили, микрокапсулу; капсула непостоянна. Аэробы. Повышенная концентрация углекислого газа стимулирует рост менингококков. 12

Факторы Биологический эффект вирулентнос ти Эндотоксин Опосредует большинство клинических проявлений Пили (белок Прикрепление менингококков к пилин) клеткам человека, главным образом, к эпителию носоглотки оболочек мозга Капсула Антифагоциарная активность Ig. A-протеазы Расщепление молекулы Ig. A в шарнирной области, что защищает бактерии от действия 13 антител

Культуральные свойства. Строгий аэроб. Капнофил. Очень требователен к питательным средам и условиям культивирования. На простых питательных средах не растет, поэтому для его культивирования к основным средам добавляют нативные белки (сыворотка, кровь, яичный желток и др.). В качестве источников углерода и азота используют аминокислоты. 14

Температурный оптимум роста 37°С, рост наблюдается в пределах 30 -38°С. Повышенная концентрация СО 2 и влажность стимулируют рост менингококков. На сывороточном агаре образует круглые бесцветные нежные колонии маслянистой консистенции диаметром от 0, 5 до 1, 5 мм. В отлличие от условно-патогенных нейссерий не образует пигмента. 15

Биохимическая активность низкая. Разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты, не разжижает желатин, не образует индол и сероводород, не восстанавливает нитраты. 16

Антигенная структура. Имеет несколько АГ: родовые, общие для рода нейссерий (белковые и полисахаридные, которым представлены-полимерами аминосахаров и сиаловых кислот); видовой (протеиновый); группоспецифические (гликопротеидный комплекс); типоспецифические (белки наружной мембраны). 17

Факторы патогенности. Основной фактор патогенности – капсула, защищающая менингококки от различных воздействий, в первую очередь от фагоцитоза АТ, образующиеся к полисахаридам капсулы, проявляют бактерицидные свойства. Токсические проявления менингококковой инфекции обусловлены высокотоскичным эндотоксином, который по летальности для лабораторных животных сравним с 18

Устойчивость в окружающей среде. Слабо устойчив к внешним воздействиям, в оптимальных условиях на плотных и жидких средах культура гибнет через 48 -72 ч, на полужидких средах сохраняется до месяца (рекомендуют сохранять на среде Дорсе, полужидком агаре и среде со сливками). Наиболее приемлемый способ концентрации культуры – лиофильное высушивание. 19

Эпидемиология. Экологической нишей для менингококка является слизистая оболочка носоглотки человека. Источник инфекции – больной человек или носитель. Различают три группы источников инфекции: больные генерализованными формами (около 1% от общего числа инфицированных лиц), больные назофарингитом (1020% от общего числа инфицированных лиц) и здоровые носители. 20

Патогенез. Менингококки внедряются в организм человека через слизистые оболочки носоглотки. Размножаясь, они формируют первичный очаг воспаления. По окончаниям обонятельного нерва воспалительный процесс может распространяться на оболочке мозга. 21

Клиника. Менингококковая инфекция клинически протекает в локализованной форме: менингококконосительство, острый назофарингит или в генерализованной форме: менингококцемия, менингит, менингоэнцефалит, эндокардит, артрит, полиартрит, иридоциклит, пневмония. 22

Иммунитет. Постинфекционный иммунитет при генерализованных формах инфекции довольно стойкий, повторные случаи заболевания почти не наблюдаются, однако иммунитет носит гуморальный и группоспецифический характер. 23

Микробиологическая диагностика. Выбор материала для исследования обусловлен клинической формой болезни. Материалом для исследования служат носоглоточная слизь (от больных и носителей), ликвор, кровь, гной с мозговых оболочек, соскоб из элементов гемморагической сыпи на коже и др. 24

Для микробиологической диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы. Бактериоскопическое исследование ликвора и крови позволяет определить наличие возбудителя. При наличии гнойного ликвора готовят мазки без предварительной обработки; если ликвор прозрачный или мутный, его центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 мин. 25

Бактериологическое исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка. Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку, кровь или асцитическкую жидкость. 26

Серологический метод используют для обнаружения растворимых бактериальных АГ в ликворе и других видах исследуемого материала или АТ в сыворотке крови. Для обнаружения АГ применяют ИФА, РИА, иммуноэлекрофорез, реакцию коагглютинации. У больных менингококковой инфекцией АТ обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2 -3 -й неделе, а затем их титр снижается. 27

Лечение. Препарат выбора – бензилпенициллин, эффективны также полусинтетические пенициллины (ампициллин, оксациллин). Оптимально назначение антибиотиков в сочентании с диуретиками. При непереносимости пенициллинов назначают левомицетин или рифампицин. 28

Профилактика. Проводится комплекс мер, направленных на ликвидацию источника инфекции: больных необходимо выявлять, изолировать и лечить; носителей – выявлять и санировать. Проводится бактериологическое исследование в окружении больного с целью выявления здоровых носителей менингококков. Выявленные носители санируются антибиотиками. 29

Применяется менингококковая химическая полисахаридная вакцина серогрупп А, В, С. Перспективна поливалентная менингококковая вакцина с полисахаридами 30

Гонококковая инфекция – это острое или хроническое инфекционное заболевание человека, вызываемое Neisseria gonorrhoeae, которое предается половым путем и характеризуется гнойным воспалением слизистой оболочки мочеполовых путей (гонорея), конъюнктивы глаз) бленнорея, других органов, интоксикацией. 31

32

Заболевания: уретрит, цервицит, сальпингит, проктит, бактериемия, артрит, конъюнктивит, фарингит. Источник инфекции – больной человек. Возбудитель передается половым путем, реже через предметы обихода. При бленнорее заражение новорожденного происходит через инфицированные родовые пути матери. 33

Морфология. Неподвижные аспорогенные грамотрицательные диплококки (средний размер клетки 1, 25 -1, 0 х0, 7÷ 0, 8 мкм), образующие капсулу. Полиморфны – встречаются более мелкие или более крупные клетки, а также палочковидные формы. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.), цитоплазма имеет осмиефильные включения. 34

Культуральные свойства. Аэробы, хемоорганотрофы; для роста требуют свежеприготовленных влажных питательных сред с добавлением нативных белков крови; широко используют безасцитные среды (например, среда КДС-1 с гидролизатом казеина, дрожжевым аутолизатом и нативной сывороткой); оптимум р. Н 7, 2 -7, 4, температуры - 37°С. 35

Биохимическая активность крайне низкая. Разлагают только глюкозу с образованием кислоты, измененные формы иногда не ферментируют ни одного углевода, продуцируют каталазу и цитохромоксидазу. Протеолитическая активность отсутствует, аммиака, сероводорода и индола не образуют. 36

Антигенная структура сложная. Содержат соматический и капсульный антигены. ЛПС проявляют сильные иммуногенные свойства; основной пул антител, синтезируемых в организме составляют Ig к ЛПС, которые обладают бактерицидным действием. Основную антигенную нагрузку несут пили и поверхностные белки наружной мембраны. 37

Факторы патогенности. Капсула, пили, эндотоксин, поверхностные белки наружной мембраны, протеазы. Все свежевыделенные культуры имеют капсулу, которая обладает антифагоцитарным действием (препятствует прямому контакту микробицидных субстанций с клеточной стенкой, маскирует её антигенные детерминанты). АТопсонины к АГ капсулы стимулируют фагоцитоз гонококков. 38

Факторы вирулентности Биологический эффект Пили (белок пилин) Прикрепление гонококков к эпителию влагалища фаллопиевых труб и полости рта Капсула Антифагоцитарная активность Белки наружной мембраны: Протеин I Способствует внутриклеточному выживанию бактерий, препятствуя слиянию лизосом с фагосомой нейтрофилов Протеин II Опосредует плотное прикрепление к эпителиальным клеткам и инвазию внутрь клеток Протеин III Защищает поверхностные антигены LOS Липоолигосахарид обладает свойствами эндотоксина Ig. A 1 -протеаза Разрушает Ig. A 1 -протеаза Бета-лактамаза Гидролизует бета-лактамное кольцо пенициллинов 39

Устойчивость в окружающей среде. Гонококки очень неустойчивы во внешней среде, что следует помнить при заборе и транспортировке исследуемого клинического материала. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов, особенно к солям тяжелых металлов. Высокочувствительны к пенициллинам, тетрациклинам, стрептомицину. 40

Эпидемиология. Термин «гонорея» ввел Талон во II в. Н. э. , хотя заболевание известно очень давно; во всяком случае, в вавилонских, ассирийских и греческих мифах упоминается болезнь, являющаяся судя по описанию клинической картины гонореей. В настоящее время гонорею относят к наиболее распространенным инфекционным заболеваниям, передаваемым половым путем. 41

Патогенез. Входными воротами для возбудителя служит цилиндрический эпителий уретры, шейки матки конъюнктивы и прямой кишки. Взаимодействие гонококков с эпителиальными клетками опосредовано пилями, взаимодействующими с рецепторами эпителиальных клеток, что имеет решающее значение в развитии инфекции. 42

Клиника. Гонококковая инфекция проявляется в виде гнойного воспаления слизистой оболочки мочеполовых путей (гонорея), конъюнктивы глаз (бленнорея), других органов. Инкубационный период 2 -4 дня. 43

Заболевание характеризуется резью при мочеиспускании, выделению гноя из уретры. Заболевание имеет тенденцию к переходу в хроническую бессимптомную форму. Нелеченая гонорея является одной из основных причин бесплодия как у мужчин, так и у женщин. Нелеченая бленнорея ведет к слепоте. 44

Иммунитет по своему механизму – нестерильный, практически отсутствует после перенесенного заболевания, поэтому часто регистрируются повторные заболевания. 45

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища и шейки матки, из прямой кишки и глотки (Neisseria gonorrhoae часто обнаруживают при бессимптомном течении болезни в отделяемом из прямой кишки у женщин и мужчин-гомосексуалистов), с конъюнктивы глаза (при бленнорее), а также сыворотка крови. 46

Для диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы. Бактериоскопическое исследование является основным методом диагностики острой гонореи и бленнореи. Готовят два мазка, один из которых окрашивают по Граму, а второй – метиленовым синим, и микроскопируют. 47

Бактериологическое исследование проводят в тех случаях, когда гонококки в мазках не обнаруживают или находят атипичные, измененные формы. Культуральный метод позволяет выявлять гонококки в 4, 5 -4, 0 раза чаще, чем бактериоскопический меод. 48

Серологический метод используют при хронической гонорее, при отсутствии у больного выделений. Проводят РСК по Борде-Жангу по стандартной схеме, которая бывает положительной с 3 -4 недели болезни. 49

Лечение. Характер терапии зависит от формы заболевания (острая или хроническая), топического диагноза, наличия осложнений и состояния организма. При острой и подострой гонорее обычно применяют препараты пенициллина. Другие антибиотики, как правило, применяют при непереносимости пенициллина. 50

Профилактика. Проводится комплекс мер, направленных на ликвидацию источника инфекции: больных необходимо выявлять и лечить. Особое внимание следует уделить активному выявлению больных гонореей среди пациентов урологических клиник, мужей и женщин, страдающих воспалительными заболеваниями неясной этиологии, в обязательном порядке обследовать всех членов семьи больного гонореей, декретированных групп населения (работники детских дошкольных учреждений и общепита) перед поступлением на работу в последующем 51 каждые три месяца.

УРОГЕНИТАЛЬНЫЕ ИНФЕКЦИИ Из возбудителей уретритов, передающихся половым путем, на первом месте стоят хламидии, затем микоплазмы, обусловливающие урогенитальный хламидиоз и уреаплазмоз. Клиническая картина этих заболеваний во многом напоминает течение гонококковой инфекции, но отличается от неё меньшей остротой воспаления, преобладанием вялых, малосимптомных форм, склонностью к затяжному течению и большей частотой 52 осложнений

УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ Возбудителем является Chlamidia trachomatis (серовары Д, F, У, H, I, J, K) во многом сходная с возбудителями трахомы 53

Морфология Хламидии мелкие, сферической формы грамотрицательные бактерии. Проникнув в мочеполовые органы, хламидии размножаются в эпителиальных клетках уретры, влагалища, шейки матки, прямой кишки, вызывая воспалительную реакцию. 54

55

56

Хламидии являются причиной внематочной беременности, ранних выкидышей, послеродовых инфекционных осложнений. Особую опасность хламидийная инфекция представляет для новорожденных. Чаще всего это конъюнктивы, фарингиты, уретриты и пневмонии 57

Неонатальные пневмонии могут иметь тяжелое течение и приводить к летальному исходу. Хламидийные инфекции мочеполовой системы являются одной из основных причин женского и мужского бесплодия 58

I. Бактериоскопический метод. В мазках отпечатках из пораженных органов или из соскобов цервикального канала, окрашенных по Романовскому-Гимзе обнаруживаюся в клетках цилиндрического эпителия хламидийные включения – элементарное ельце розового цвета или ретикулярные ельца голубовато-синего цвета. 60

II. Выделение хламидий из исследуемого материала производят заражением куриных эмбрионов в желточный мешок или культуры клеток. В пораженных клетках обнаруживают включения, которые выявляют иммунофлюоресцентным или иммуноферментным методами. III. Для выявления антител применяют РСК, РНГА, ИФА. 61

Лечение Хороший результат дают макролиды (эритромицин) и тетрациклины, комбинированные препараты, включающие тетрациклин и эритромицин (эрициклин) или комбинации эритромицина с рифампицином. Повышать защитные силы организма, неспецифическая иммунотерапия, биогенные симуляторы и витаминотерапия. 62

УРЕАПЛАЗМОЗ Возбудителем является микоплазмы – ureaplasma urealyticum. Вызывает уретриты, сальпингиты, кольпиты, преждевременные роды, выкидыши, мертворождения. Микоплазменные инфекции играют существенную роль в патологии беременности. 63

Отличительной особенностью микоплазм является отсутствие клеточной стенки, что обусловливает плеоморфность. Они могут быть округлые нитевидные. Небольшие размеры проходят через овоидные бактериальные фильтры, неподвижны, грамотрицательны. 64

Культуральные свойства Растут на питательных средах с добавлением сыворотки. Образуют характерные колонии, врастающие центральной частью в питательную среду. Вид колонии напоминает яичницуглазунью. 65

Лабораторная диагностика 1. Серологические методы: РСК, РНГА, ИФА, РИФ 2. Бактериологический метод Лечение Эритромицин и антибиотики тетрациклинового ряда 66

Бактериоскопия – самый распространённый гинекологический анализ. Женщины и девушки разного возраста при прохождении профосмотра обязательно подвергаются такой процедуре. У 50-60% из них в мазке на флору обнаруживаются кокки. У мужчин они встречаются гораздо реже. Это связано с особенностями строения женской половой системы. Также кокки могут быть выявлены в мазке у ребёнка.

Бактерии при определённых обстоятельствах способны спровоцировать серьёзные заболевания мочеполовых и других органов, поэтому целесообразно узнать, что они собой представляют, когда угрожают здоровью и как с ними бороться.

Что такое кокки

В человеческом организме присутствует множество разных микробов. Кокки – семейство одноклеточных, названное от слова coccus, что в переводе с латыни означает – «шаровидный», а с древнегреческого – «зерно». Как и другие бактерии, кокки обладают уникальной способностью к интенсивному размножению (примерно каждые полчаса). В благоприятных условиях одноклеточные делятся надвое, т.е. дробятся, из-за чего их ещё именуют «дробянками», а далее либо существуют по отдельности, либо объединяются в группы. Кокки неподвижны, не образуют споры и являются анаэробными (могут обитать в безвоздушной среде).

Нормальная микрофлора

Здоровая микрофлора женских половых органов состоит из лактобактерий – палочек Дедерлейна, бифидобактерий и незначительного (около 5%) количества кокков. За счёт этого обеспечивается нормальное течение таких процессов, как:

• обмен веществ;
• регуляция уровня кислотности;
• уничтожение болезнетворных микробов.

Само по себе присутствие кокков в мазке у женщин неопасно и естественно. Когда баланс микроорганизмов поддерживается на должном уровне, в кислой среде полезные лактобактерии размножаются и создают защиту от грибков (молочницы), кишечной палочки и других вредных микробов. Соответственно, мочеполовая система функционирует стабильно и полноценно.

О чём говорят кокки в мазке

При нарушении микроклимата картина меняется: содержание кокков увеличивается, а полезные бактерии гибнут, поэтому если количество кокков в мазке превышает норму, это говорит о проблемах со здоровьем.

Важно! Норма: рН (уровень кислотности) – до 5. Слабокислая среда (начало воспалительного процесса): рН – до 7. Повышенная щелочная среда (активно развивается инфекция или воспаление): рН – более 7,5.

Для определения конкретного заболевания необходимо установить, какая именно разновидность шаровидных бактерий присутствует в избытке, а также выяснить наличие грамотрицательных и грамположительных кокков в мазке. Эти термины появились благодаря датскому учёному Граму и его методу выявления устойчивых к медикаментам кокков. Дело в том, что многие бактерии имеют очень прочную оболочку, непроницаемую для большинства обычных антибиотиков (грамотрицательные). Но и те микроорганизмы, чья клеточная стенка разрушается под воздействием антибактериальных препаратов (грамположительные), тоже способны вызывать серьёзные патологии, поскольку в результате продуктов их распада происходит интоксикация организма. Только благодаря крепкому иммунитету и соблюдению всех правил лечения норма бактерий восстанавливается.

На вопрос: «Что значат кокки в мазке у женщины?» можно ответить так: дисбактериоз влагалища, снижение защитных функций лактобактерий и повышенная вероятность воспалительных процессов. Кокки в мазке у мужчин также указывают на нарушение работы мочеполовой системы.

Внимание! Такое состояние требует квалифицированной медицинской помощи. Народные методы, самостоятельный приём антибиотиков и других лекарств крайне нежелательны и могут лишь усугубить ситуацию.

Разновидности кокков

Выделяют несколько разновидностей бактерий, многие из которых являются условно-патогенными:

1. Диплококки (известно более 80 видов). Существуют парами, бывают грамотрицательными и грамположительными. К наиболее патогенному типу относится гонококк – возбудитель гонореи. Заболевание стоит на первом месте по распространённости в числе ИППП (инфекций, передающихся половым путём).
2. Стрептококки – микробы, соединённые в цепочку. Внешне кокки в мазке выглядят, как палочки, образованные из нескольких шароподобных клеток. На сегодняшний день открыто более 100 типов стрептококков (все грамположительные). Размножаясь в половых органах, они вызывают вагинит (воспаление влагалища), цистит (воспаление мочевого пузыря), цервицит (воспаление шейки матки), эндометрит (воспаление слизистой матки) и прочие патологии.
3. Стафилококки (грамположительные). Представляют собой скопления, похожие на грозди винограда. Насчитывается 27 видов возбудителей, наиболее опасный – золотистый стафилококк. Присутствие большого количества стафилококков во влагалище способствует активному размножению других болезнетворных микробов, например грибков кандида (молочница). На фоне этого нередко воспаляются слизистая и придатки матки.
4. Энтерококки (кокки овальной формы, располагающиеся цепочками или парами) – условно-патогенные представители кишечной микрофлоры, которые при недостаточности гигиены способны стремительно развиваться в мочеполовой системе.
5. Коккобациллы (промежуточная между бациллами и кокками форма). Гемофильная палочка, гарднерелла, хламидии обнаруживаются при наличии венерических заболеваний, бактериального вагиноза.
6. Гонококки. Имеют грамотрицательную структуру и овальную форму. При поражении мочеполового тракта вызывают воспалительную реакцию с последующим развитием цервицита и сальпингита.

Причины

Факторов, провоцирующих патологию, огромное множество. Основные причины кокков в мазке:

1. Неграмотное лечение. В том случае, если человек принимает антибактериальные препараты без назначения или не соблюдает дозировку, вероятность поражения патогенными микробами многократно повышается.
2. Пренебрежение личной гигиеной. Игнорирование элементарных правил, неправильное выполнение процедур увеличивают риск нарушения микрофлоры влагалища. Нужно помнить, что мыло – это щёлочь, и слишком глубокие подмывания негативно влияют на кислотно-щелочной баланс. Для женщин, девушек и девочек целесообразно использовать специальные средства для интимной гигиены. Также важно совершать манипуляции от влагалища к анальному отверстию, а не наоборот.
3. Ношение белья из плотных материалов или синтетики плохо сказывается на состоянии микроклимата половых органов.
4. Беспорядочная сексуальная жизнь. Незащищённый контакт с носителем патогенных микробов в 99 случаев из 100 приводит к заражению. Кроме того, если не иметь постоянного партнёра и при этом регулярно заниматься сексом, микрофлора будет неизбежно подвергаться воздействию «чужих» бактерий.
5. Спринцевание. Из-за частых спринцеваний полезная флора вымывается.
6. Гормональные сбои. Расстройства гормонального фона вызывают бактериальный дисбаланс.
7. Ослабленный иммунитет. Когда защитные функции организма снижаются, он не может противостоять опасным возбудителям.

Сопутствующие симптомы

Тревожные признаки, связанные с нарушением микрофлоры урогенитальной сферы, в 90% случаев сложно не заметить. У женщин выделения из влагалища приобретают специфический запах (кисломолочный или рыбный), становятся обильными.

Общие для мужчин и женщин симптомы кокков в мазке:

• неприятные ощущения при мочеиспускании и близости;
• зуд и жжение разной степени выраженности;
• отёчность гениталий;
• желтоватые, белые, гнойные, кровянистые выделения из половых органов.

Женщины часто жалуются на боли внизу живота, слабость, отсутствие аппетита. Это связано с тем, что в процессе жизнедеятельности патогенные клетки продуцируют токсические вещества. Также образуются очаги воспаления, из-за которых возникает ощутимый дискомфорт.

Осложнения

Если вовремя не обследоваться и не начать лечение, кокковые инфекции будут распространяться на соседние органы, слизистые и кожные покровы. Осложнения во многом зависят от разновидности клеток. Например, стрептококк провоцирует менингит, пневмонию, остеомиелит (поражение костных тканей). Стафилококк вызывает эндокард (воспаление внутренней оболочки сердца), пиодермию (гнойные воспалительные процессы под кожей), пневмонию, бронхит, заболевания верхних дыхательных путей (риниты, синуситы) и пищеварительного тракта. Кроме того, размножение патогенных бактерий во влагалище снижает выработку эстрогенов, что в результате становится причиной выкидышей и бесплодия.

Кокки в мазке при беременности осложняют процесс вынашивания ребёнка. Рост и развитие плода напрямую связаны с состоянием здоровья будущей матери, а воспалительный процесс может затрагивать не только прямую кишку и мочевыводящий канал, но и матку. Чтобы предотвратить опасность, следует планировать беременность заранее и при необходимости проводить терапию.

Наиболее распространённые последствия кокковых инфекций:

• эрозия шейки матки;
• эндометрит;
• пиелонефрит (поражение почек).

У мужчин при отсутствии адекватного лечения кокки приводят к простатиту (воспаление простаты), поражению яичек и семенных канальцев. Всё это грозит импотенцией и бесплодием.

Диагностика

Диагностика представляет собой лабораторное обследование. У женщин с задней стенки влагалища, мочеиспускательного канала и канала шейки матки делают забор мазка. Мужчинам в уретру вводят специальный зонд (если воспаление уже началось, манипуляции могут быть болезненными). Далее образец биоматериала отправляется в лабораторию, где его окрашивают (метод Грама) и исследуют под микроскопом. В некоторых случаях может потребоваться дополнительная диагностика: мазок из зёва и носовой полости (при подозрении на стафилококк), общие анализы крови и мочи.

Перед проведением процедуры важно придерживаться следующих правил:

• не мочиться за 2 часа;
• не употреблять острую пищу и алкоголь за 3-5 дней;
• не принимать лекарственные препараты за 3-5 дней;
• воздержаться от близости за 2 дня;
• не использовать вагинальные свечи, не спринцеваться за 2 дня.

Внимание! Анализ сдают перед менструацией или спустя 4-5 суток после её окончания.

Лечение

Если обнаружено аномальное количество кокков в мазке, лечение нужно проводить в соответствии со всеми врачебными предписаниями. Настоятельно рекомендуется не использовать антибиотики общего назначения. Как уже упоминалось, многие кокки устойчивы к таким медикаментам, поэтому терапия может оказаться не только безрезультатной, но и опасной. Под воздействием антибактериальных средств рост патогенных клеток начнёт увеличиваться, а численность полезных бактерий – снижаться.

Для того чтобы борьба с кокками была максимально эффективной, предварительно проводится тест на чувствительность. Антибиотикограмма – бакпосев влагалища на питательную среду позволяет определить уровень восприимчивости патогенных клеток к тем или иным препаратам.

Одним из наиболее действенных препаратов против кокковых инфекций считается «Метронидазол». Его основное преимущество – отсутствие противопоказаний к применению в период беременности и кормления грудью. Совместно с антибиотиками используют лекарства, содержащие лакто-, и бифидобактерии. Для восстановления нормальной микрофлоры применяются вагинальные свечи, мази и кремы, обладающие антисептическими свойствами. Одновременно могут быть назначены иммуномодулирующие средства. Спринцевания травяными отварами нужно выполнять строго с разрешения гинеколога.

Внимание! Параллельно проходить лечение должен и постоянный половой партнёр. В это время лучше воздержаться от секса и мастурбации, использования тампонов.

После завершения курса терапии мазок на флору делают повторно. При отсутствии положительного результата подбирается другая группа антибиотиков. В 70-80% случаев госпитализация не требуется, лечение проводится в домашних условиях или амбулаторно.

Профилактика

Предотвратить рост и размножение кокков в организме можно посредством соблюдения элементарных правил:

• не забывать о ежедневной интимной гигиене;
• отказаться от беспорядочных половых связей (или всегда пользоваться барьерными контрацептивами);
• укреплять иммунитет, сбалансировано питаться, не пренебрегать физическими нагрузками, гулять на свежем воздухе, пить поливитаминные комплексы;
• отдавать предпочтение нижнему белью из натуральных тканей.

Сегодня благодаря современным методам диагностики опасные заболевания можно выявить ещё на начальном этапе. Это упрощает ход лечения и улучшает прогноз. Каждой половозрелой женщине рекомендуется как минимум 1-2 раза в год посещать гинеколога и делать мазок на флору. Обязательно сдавать анализы при беременности и на стадии планирования зачатия.

Важно помнить, что проще поддерживать нормальную микрофлору, чем потом избавляться от бактерий и лечить болезни, спровоцированные кокками.